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高效色譜儀中譜峰展寬的柱外因素
高效色譜儀分析中色譜峰展寬的柱外因素有進樣器、檢測器和連接管中的死體積。采用細(xì)內(nèi)徑的管路,盡量減小連接管路的長度,采用死體積小的檢測器,采用合適的進樣方式和技術(shù),可降低柱外效應(yīng)。
采用細(xì)內(nèi)徑的管路,盡量減小連接管路的長度。
若管路內(nèi)徑減小,其長度可增加。若管路內(nèi)徑增大,其長度要縮短。內(nèi)徑0.25mm連接管應(yīng)為100mm左右或更短。內(nèi)徑0.5mm連接管,長度應(yīng)在10mm以下。
連接管內(nèi)徑減小,管內(nèi)壓力降較大,泵壓會上升。
采用死體積小的檢測器。
一般檢測池內(nèi)色譜峰展寬小于總的色譜峰展寬的10%時,要求檢測池體積小于14μL,一般為5~8μL。
采用合適的進樣方式和技術(shù)。
進樣有時是色譜峰展寬的主要原因,這取決于進樣體積和進樣方式。
進樣體積越大,柱外效應(yīng)越大。
進樣方式一般有閥進樣與注射器進樣兩種。閥進樣允許進樣體積大,注射進樣允許進樣體積小。進樣體積還與溶質(zhì)k值有關(guān),溶質(zhì)k值越大,允許進樣的體積越大。
對于GC,由于色譜柱體積占色譜系統(tǒng)總體積的比例很大,柱外效應(yīng)比較小。而HPLC由于色譜柱體積較小,溶質(zhì)在液相中擴散系數(shù)很低,柱外效應(yīng)對于色譜峰展寬成為不可忽略的因素,使用細(xì)內(nèi)徑色譜柱,考慮柱外效應(yīng)尤為重要。
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